沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2006年專(zhuān)升本檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)專(zhuān)業(yè)課考試大綱(理論部分) 


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理論部分

生化及生化檢驗(yàn)考實(shí)大綱 

第一章  蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能                     

掌握蛋白質(zhì)的各級(jí)結(jié)構(gòu)及其相應(yīng)化學(xué)鍵。

掌握蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)。

第二章  核酸的結(jié)構(gòu)與功能                      

    1. 掌握核酸的基本組成單位及其連接方式。

    2. 掌握DNARNA組成的區(qū)別。

    3. 掌握DNARNA的結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)。

    4. 熟悉DNARNA的功能。

    5. 了解DNA變性。

                                 

1. 掌握酶的催化作用特點(diǎn)。

    2. 掌握酶的分子結(jié)構(gòu),酶的必需基團(tuán),酶的活性中心。

    3. 掌握同工酶。

    4. 掌握影響酶促反應(yīng)速度的因素,酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用。

第四章   糖代謝                            

    1. 掌握糖的無(wú)氧酵解,有氧氧化,限速酶及其催化的反應(yīng)。

    2. 掌握磷酸戊糖途徑的生理意義。

第五章  脂類(lèi)代謝                              

    1. 掌握脂肪的動(dòng)員,脂肪酸的β-氧化。

    2. 掌握血漿脂蛋白分類(lèi)。

第六章   生物氧化                           

    1. 掌握生物氧化概念。

    2. 掌握三羧酸循環(huán)的基本途徑,生理意義。

    3. 掌握ATP生成方式。

第七章  氨基酸代謝                         

    1.掌握氨基酸的一般代謝。

    2. 掌握氨的代謝,氨的轉(zhuǎn)運(yùn),一碳單位代謝。

第八章    DNA的生物合成(復(fù)制)                   

    1. 掌握DNA的半保留復(fù)制,生物學(xué)的中心法則。

    2. 熟悉DNA的復(fù)制過(guò)程。

第九章    RNA的生物合成(轉(zhuǎn)錄)          

    1. 掌握復(fù)制與轉(zhuǎn)錄的區(qū)別。

    2. 熟悉轉(zhuǎn)錄的過(guò)程及真核生物mRNA轉(zhuǎn)錄后的修飾與加工。

第十章    蛋白質(zhì)的生物合成(翻譯)       

掌握參與蛋白質(zhì)生物合成的物質(zhì)。

熟悉翻譯的大致過(guò)程。

參考教材

生物化學(xué)(第四版)黃詒森 主編  北京: 人民衛(wèi)生出版社 2001

生化檢驗(yàn)

第一章   生物化學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)本

      1. 了解生化檢驗(yàn)的常用標(biāo)本

第二章   常用生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)

掌握分光光度法的基本原理及操作方法。

掌握火焰光度法的臨床應(yīng)用。

掌握電泳、電泳技術(shù)的分類(lèi),影響電泳速度的因素。

      4. 掌握層析的概念與分類(lèi)。

第三章   分子生物學(xué)技術(shù)

掌握DNA的分離與純化。

掌握重組DNA技術(shù)。

掌握聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)的定義及基本步驟。

了解分子雜交中探針?lè)N類(lèi),分子雜交種類(lèi)。

第四章   酶類(lèi)分析技術(shù)

掌握酶促反應(yīng)底物動(dòng)力學(xué)。

了解酶活性測(cè)定在臨床上的應(yīng)用。

第五章   鈉、鉀、氯和酸堿平衡檢驗(yàn)

掌握鈉、鉀、氯測(cè)量方法。

掌握血?dú)夥治鰷y(cè)量方法。

第六章   鈣、磷、鎂和微量元素測(cè)定

      1. 掌握血清鈣測(cè)定的方法。

第七章   肝功能檢驗(yàn)

      1. 掌握氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定的方法。

第八章   腎臟功能檢驗(yàn)

掌握蛋白尿的選擇指數(shù)。

掌握腎小球損傷的敏感指標(biāo)。

第九章   心臟標(biāo)志物檢驗(yàn)

1. 掌握酶類(lèi)標(biāo)志物和蛋白類(lèi)標(biāo)志物中最具有臨床診斷意義的指標(biāo)。

2. 掌握急性心梗后心肌酶的時(shí)相變化。

      3. 掌握早期標(biāo)志物。

第十章   腫瘤標(biāo)志物檢驗(yàn)

掌握腫瘤標(biāo)志物的概念。

了解肝癌的診斷與鑒別診斷。

第十一章   治療藥物監(jiān)測(cè)

掌握治療藥物監(jiān)測(cè)的概念。

參考教材

生物化學(xué)檢驗(yàn)(第2版)李萍 主編  北京: 人民衛(wèi)生出版社 2002]

微生物學(xué)及微生物學(xué)檢驗(yàn)

   緒論

掌握微生物的概念與分類(lèi),微生物的特點(diǎn)。

熟悉微生物與人類(lèi)的關(guān)系。微生物學(xué)及微生物學(xué)檢驗(yàn)在醫(yī)學(xué)上的地位與任務(wù)。

第一篇   細(xì)菌學(xué)總論

第一章   細(xì)菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)

1、掌握細(xì)菌的基本形態(tài),細(xì)胞壁的功能、化學(xué)組成、革蘭陽(yáng)性菌與革蘭陰性菌區(qū)別,L型細(xì)菌;質(zhì)粒的意義,胞漿內(nèi)含物;細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)、功能、意義。

2、熟悉細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)

細(xì)菌的生理

1、掌握細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的條件、方式和速度,需氧菌、厭氧菌,兼性厭氧菌的特點(diǎn);細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物及意義。細(xì)菌的分解代謝。

2、熟悉細(xì)菌的新陳代謝。

細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)類(lèi)型。

第三章   細(xì)菌的分布菌

掌握正常菌群、菌群失調(diào)、生態(tài)失調(diào)等基本概念。

熟悉細(xì)菌在人體的分布、菌群失調(diào)的誘因、常見(jiàn)菌類(lèi)。

了解細(xì)菌在自然界的分布。

第四章   外界因素對(duì)細(xì)菌的影響

1、掌握消毒、滅菌、無(wú)菌、防腐、抑菌等基本概念。生物因素對(duì)細(xì)菌的影響。噬菌體的定義、生物學(xué)性狀、噬菌體與宿主菌的相互關(guān)系。細(xì)菌素。

熟悉用物理和化學(xué)消毒滅菌的種類(lèi)及應(yīng)用。常用消毒劑的殺菌機(jī)理。

了解影響消毒滅菌效果的因素

第五章   細(xì)菌的遺傳與變異

掌握細(xì)菌遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)(染色體、質(zhì)粒、轉(zhuǎn)位因子)。

熟悉細(xì)菌變異的機(jī)理。基因的轉(zhuǎn)移與重組(轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)體融合)。

了解細(xì)菌變異的現(xiàn)象、細(xì)菌遺傳變異的實(shí)際應(yīng)用。

第六章   細(xì)菌的感染與免疫

掌握感染、細(xì)菌的致病性、菌血癥、敗血癥、毒血癥、膿毒血癥、帶菌狀態(tài)等基本概念;細(xì)菌的致病物質(zhì)基礎(chǔ)。醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)。

熟悉內(nèi)外毒素的區(qū)別。醫(yī)院感染的概念、流行病學(xué)監(jiān)測(cè)的微生物學(xué)檢驗(yàn)和質(zhì)控;醫(yī)院感染的重點(diǎn)科室及診斷標(biāo)準(zhǔn)、控制。

了解機(jī)體的抗菌免疫。

                     第七章  細(xì)菌的分類(lèi)與命名

1、掌握細(xì)菌的分類(lèi)單位、分類(lèi)系統(tǒng)和命名。

2、熟悉細(xì)菌的分類(lèi)方法。

  細(xì)菌檢驗(yàn)的基本技術(shù)

第八章   細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查

掌握常用顯微鏡的種類(lèi)、原理、使用。細(xì)菌的染色法(不染色標(biāo)本的檢查、染色標(biāo)本的檢查)革蘭氏染色法、抗酸染色法的方法、結(jié)果、原理、意義。

2、染料的組成、種類(lèi)。細(xì)菌染色的一般程序

第九章   細(xì)菌的培養(yǎng)與分離技術(shù)

掌握培養(yǎng)基的定義、制備、種類(lèi)。

熟悉細(xì)菌的人工培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)菌的生長(zhǎng)現(xiàn)象

了解培養(yǎng)基的成分。

第十章   細(xì)菌的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)

掌握常見(jiàn)菌屬鑒定常用的生化實(shí)驗(yàn)的原理、結(jié)果、意義。

熟悉鑒定細(xì)菌用的藥物敏感實(shí)驗(yàn)。

第十一章   血清學(xué)實(shí)驗(yàn)

熟悉血清學(xué)鑒定與血清學(xué)診斷的主要類(lèi)型。

第十二章   動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

掌握動(dòng)物采血法。

熟悉常見(jiàn)細(xì)菌性疾病動(dòng)物接種的鑒別診斷;動(dòng)物接種途徑和方法。

了解實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分類(lèi)與選擇。

第十三章   菌種保存與管理

熟悉菌種的保存的目的、方法。

了解菌種的管理、分類(lèi)。

第十四章   細(xì)菌檢驗(yàn)的自動(dòng)化、微型設(shè)備和新技術(shù)

熟悉微生物數(shù)碼分類(lèi)鑒定系統(tǒng)。

了解自動(dòng)化細(xì)菌鑒定系統(tǒng)、自動(dòng)血液培養(yǎng)檢測(cè)和分析系統(tǒng)。

 

第十四章   細(xì)菌對(duì)抗菌藥物敏感實(shí)驗(yàn)

掌握需氧菌及兼性厭氧菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)

熟悉結(jié)核藥物敏感實(shí)驗(yàn)

了解厭氧菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)、真菌的藥物敏感實(shí)驗(yàn)

第十五章   臨床細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制及實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)

掌握室內(nèi)質(zhì)量控制。

熟悉室內(nèi)質(zhì)量評(píng)價(jià);實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)。

第十六章   病原性球菌、腸道桿菌及檢驗(yàn)

掌握病原性球菌檢驗(yàn)、沙門(mén)氏菌屬、志賀氏菌屬、埃希氏菌屬的檢驗(yàn)。

熟悉病原性球菌、沙門(mén)氏菌屬、志賀氏菌屬、埃希氏菌屬的生物學(xué)性狀。

了解腸道其它細(xì)菌的檢驗(yàn)。

第十七章   弧菌屬、彎曲菌屬、革蘭氏陰性桿菌及檢測(cè)

掌握弧菌屬、彎曲菌屬、革蘭氏陰性桿菌及檢測(cè)。

熟悉弧菌屬、彎曲菌屬、革蘭氏陰性桿菌的生物學(xué)性狀。

了解其它細(xì)菌的檢測(cè)。

第十八章   需氧革蘭氏陽(yáng)性桿菌、分枝菌屬、厭氧菌及檢驗(yàn)

掌握結(jié)核桿菌、白喉?xiàng)U菌、厭氧性細(xì)菌的檢驗(yàn)

2、熟悉需氧革蘭氏陽(yáng)性桿菌、分枝菌屬、厭氧菌其它細(xì)菌及檢驗(yàn)

3、了解需氧革蘭氏陽(yáng)性桿菌、分枝菌屬、厭氧菌的生物學(xué)性狀

第十九章   支原體、衣原體、螺旋體、立克次體及檢驗(yàn)

1、熟悉支原體、衣原體、螺旋體、立克次體及檢驗(yàn)

了解支原體、衣原體、螺旋體、立克次體的生物學(xué)性狀

第二十章   真菌學(xué)及檢驗(yàn)

掌握病原性真菌及檢驗(yàn)。

熟悉真菌的生物學(xué)性狀。

第二十一章   病毒的基本性狀、病毒的感染與免疫、實(shí)驗(yàn)室診斷

掌握病毒的實(shí)驗(yàn)室的診斷。

熟悉病毒的基本性狀。

了解病毒的感染與免疫。

第二十二章   呼吸道病毒、腸道病毒及檢驗(yàn)

掌握流感病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒的檢驗(yàn)

熟悉呼吸道、腸道其它病毒的檢驗(yàn)。

了解呼吸道、腸道病毒的生物學(xué)性狀。

第二十三章   肝炎病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、其它病毒及檢驗(yàn)

掌握甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒的檢驗(yàn)。

熟悉其它肝炎病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒的檢驗(yàn)。

了解肝炎病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、其它病毒的生物學(xué)性狀。

第二十四章   臨床常見(jiàn)標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查

1、掌握臨床常見(jiàn)標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查的基本要求

2、熟悉血液、尿液、糞便、膿汁的細(xì)菌學(xué)檢查

3、了解其它標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢查原則。

四、主要參考書(shū)及文獻(xiàn)

劉運(yùn)德《微生物學(xué)檢驗(yàn)》第2

張卓然《醫(yī)學(xué)微生物學(xué)和免疫學(xué)》第4

檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)《免疫學(xué)檢驗(yàn)》考試大綱

(適合醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè))

緒論

1[掌握]免疫概念

2[理解]免疫的生理功能

第一章   抗原

[掌握]  抗原的概念,特性,醫(yī)學(xué)上重要的抗原

[熟悉]  決定免疫原性的因素、抗原決定簇/表位

[了解]  抗原分類(lèi),TD-抗原,超抗原、異嗜性抗原

第二章  免疫球蛋白與抗體

[掌握]  免疫球蛋白和抗體的概念,基本結(jié)構(gòu),功能,種類(lèi)

[熟悉]  免疫球蛋白的分類(lèi),血清型,水解片段

第三章 補(bǔ)體系統(tǒng)

[掌握]  補(bǔ)體的概念,激活途徑,生物學(xué)活性/作用。

[熟悉]  補(bǔ)體激活的途徑

免疫系統(tǒng)

[掌握]  免疫系統(tǒng)的組成,細(xì)胞因子,白細(xì)胞分化抗原

[熟悉]  ADCC,免疫活性細(xì)胞,單核巨噬細(xì)胞

主要組織相容性復(fù)合體

[掌握]  MHC的概念,HLA-I類(lèi)分子與HLA-II類(lèi)分子的分布,功能

[熟悉]  MHC的結(jié)構(gòu)

免疫應(yīng)答

[掌握]  免疫應(yīng)答的概念,抗體產(chǎn)生的一般規(guī)律

[熟悉]  免疫應(yīng)答的基本過(guò)程,體液免疫,細(xì)胞免疫的特點(diǎn)

第七章  抗原與抗體反應(yīng)

1.掌握親和性的定義,血清學(xué)反應(yīng);抗原與抗體反應(yīng)的特點(diǎn);

2.熟悉抗原與抗體反應(yīng)的原理、類(lèi)型;影響抗原與抗體反應(yīng)的因素;

第八章  特異性抗體的制備技術(shù)

1.掌握免疫原的制備方法;IgG純化及鑒定方式

2.熟悉免疫原的種類(lèi),免疫血清的分離及保存,細(xì)胞破碎的常用方法,動(dòng)物采血法;單克隆抗體制備技術(shù)

3.了解蛋白質(zhì)的提純;佐劑的條件  

第九章  凝集反應(yīng)

1.掌握凝集反應(yīng)的定義及條件

2.熟悉間接凝集反應(yīng)的類(lèi)型

3.了解凝集反應(yīng)的臨床意義  

第十章  沉淀反應(yīng)

1.掌握沉淀反應(yīng)的定義,

2.熟悉 Mancini 曲線及 Fehcy曲線

第十一章  補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和補(bǔ)體測(cè)定技術(shù)

1.掌握補(bǔ)體活性測(cè)定的原理;

2.熟悉CH50測(cè)定的原理和臨床意義,C3C4測(cè)定的臨床意義

第十二章 酶免疫技術(shù)

1.掌握酶免疫技術(shù)的特點(diǎn)、分類(lèi);ELISA的基本原理,

2.熟悉常用的酶及其底物,雙抗夾心法,生物素與親和素(BAS-酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理

3.了解溝狀效應(yīng)、 免疫印跡法

第十三章  熒光免疫技術(shù)

1.掌握熒光免疫顯微技術(shù)基本原理,技術(shù)類(lèi)型及臨床應(yīng)用

2.熟悉均相熒光免疫測(cè)定的原理;流式熒光免疫技術(shù)的基本原理和應(yīng)用意義

3.了解熒光標(biāo)記物的制備,  

第十四章  放射免疫技術(shù)

1.掌握RIA原理、優(yōu)點(diǎn)及缺點(diǎn)

2.熟悉RIA適用范圍,IRMA的定義

第十五章 金免疫技術(shù)

1.掌握金免疫技術(shù)的的主要類(lèi)型

2.熟悉金免疫測(cè)定技術(shù)的原理和臨床應(yīng)用  

第十六章  化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)

1.掌握化學(xué)發(fā)光技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)和分類(lèi)

2.熟悉發(fā)光酶免疫測(cè)定

3.了解化學(xué)發(fā)光技術(shù)的臨床應(yīng)用

第十八章  免疫細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)

1.掌握分離和純化外周血單個(gè)有核細(xì)胞技術(shù);

2.熟悉T淋巴細(xì)胞數(shù)量及功能檢測(cè)

3.了解花環(huán)技術(shù)的臨床意義

第十九章 人類(lèi)白細(xì)胞抗原分型檢測(cè)技術(shù)

1.掌握SD抗原包含的類(lèi)型

2.熟悉   HLA血清學(xué)分型法的技術(shù)要點(diǎn)

3.了解HLA血清學(xué)分型法的臨床意義

第二十章  細(xì)胞因子及其受體檢測(cè)技術(shù)

1.掌握選擇細(xì)胞因子檢測(cè)法的條件,

2.熟悉細(xì)胞因子的生物學(xué)檢測(cè)法的適用對(duì)象

3.了解細(xì)胞因子受體檢測(cè)常用的方法

第二十二章  免疫學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

1.掌握免疫學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制的重要性;EQA的意義

2.熟悉   EQAPT的區(qū)別

3.了解出現(xiàn)曲線漂移的條件

第二十六章  自身免疫病及檢驗(yàn)

1.掌握ANA核型與相關(guān)疾病

2.熟悉抗核抗體的測(cè)定方法與臨床意義

3.了解測(cè)定抗ENA抗體的測(cè)定方法與臨床意義

主要參考書(shū)及文獻(xiàn)

呂世靜《臨床免疫學(xué)》第二版

朱立平《免疫學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法》

沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院2006年專(zhuān)升本檢驗(yàn)專(zhuān)業(yè)專(zhuān)業(yè)課考試大綱(技能部分)

 

技能部分

生物化學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)操作考試辦法

一、考試項(xiàng)目(按生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)方法選以下其中一項(xiàng))

    1、血清蛋白含量的測(cè)定(含分光光度法、電泳法及層析法)

    2、血清膽固醇和甘油三酯的測(cè)定(異丙醇抽提法)

    3、血糖定量(鄰甲苯胺法)

二、實(shí)驗(yàn)要求(按生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)方法,學(xué)生獨(dú)立操作,90分鐘內(nèi)完成)

    1、目的方法

    2、儀器材料

    3、結(jié)果結(jié)論

    4、注意事項(xiàng)

三、操作技能

    1、基本操作

        玻璃儀器的洗滌

        (1) 洗滌方法:A、一般洗滌劑  B、鉻酸洗液

        (2) 洗滌標(biāo)準(zhǔn):A、內(nèi)壁不掛水珠 B、外壁無(wú)字跡無(wú)標(biāo)簽 C、蒸餾水沖三遍

        吸量管的選擇和使用

        (1) 奧氏吸管 (2)移液管 (3)刻度吸管

        混勻法

        (1) 旋轉(zhuǎn) (2)攪拌 (3)彈打

    2、比色法-721分光光度計(jì)使用

        (1) 波長(zhǎng)的選擇 (2)透光度"0""100"調(diào)定 (3)樣品測(cè)定 (4)準(zhǔn)確讀取光密度 (5)儀器維護(hù)

    3、電泳法-聚丙酰胺凝膠電泳

        (1) 制膠 (2)上樣 (3)電泳 (4)剝膠 (5)染色 (6)漂洗

    4、層析法-微量離子交換法

        (1) 裝柱 (2)上樣 (3)洗脫 (4)收集 (5)定量 

    5、離心法-普通離心機(jī)使用

        (1) 嚴(yán)格平衡 (2)嚴(yán)格對(duì)稱(chēng) (3)慢啟慢停 (4)注意安全和離心異常聲音

四、評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

    1、基本操作10

    2、儀器使用10

    3、實(shí)驗(yàn)報(bào)告15分(含實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果)

        其中實(shí)驗(yàn)結(jié)果按相對(duì)誤差計(jì)分

        測(cè)定值誤差<=5%者為滿(mǎn)分

        測(cè)定值誤差在>5%-15%者扣5

        測(cè)定值誤差在>15%者扣8

五、隨機(jī)提問(wèn)

    教師對(duì)實(shí)驗(yàn)原理、現(xiàn)象、步驟及注意事項(xiàng)等隨機(jī)進(jìn)行提問(wèn)

微生物學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)操作考試內(nèi)容

微生物技能

一、考試項(xiàng)目

 1.細(xì)菌涂片標(biāo)本的制備

 2.革蘭氏染色法

 3.顯微鏡油浸鏡的使用方法

 4.細(xì)菌分離培養(yǎng)技術(shù)(平板、斜面、液體)

二、實(shí)驗(yàn)操作要求

 1.目的

 2.材料

 3.方法

 4.注意事項(xiàng)

三、操作步驟的具體要求及評(píng)分點(diǎn)

⑴細(xì)菌涂片標(biāo)本的制備

①載玻片的準(zhǔn)備

②涂菌

③干燥

④固定

⑵革蘭氏染色法

①結(jié)晶紫初染

②碘液媒染

③酒精脫色

④復(fù)染

⑶顯微鏡油浸鏡的使用方法

①鏡體垂直,不使載物臺(tái)傾斜

②識(shí)別油鏡頭(一道藍(lán)圈;100*Del

③取得最大亮度(集光器升到最高點(diǎn),光圈開(kāi)大,轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡)

④觀察物象(加油,調(diào)焦點(diǎn))

⑤清潔保養(yǎng)(擦拭鏡油,下降集光器,歸位)

⑷細(xì)菌分離培養(yǎng)技術(shù)

①平板劃線法(連續(xù)劃線法、分段劃線法)

②斜面培養(yǎng)基接種法

③液體培養(yǎng)基接種法

免疫學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)操作考試內(nèi)容

一、考試項(xiàng)目

 1.玻片凝集

 2.試管凝集

 3.間接凝集抑制試驗(yàn)

 4ELISA

二、實(shí)驗(yàn)操作要求

1.目的

 2.材料

 3.方法

 4.注意事項(xiàng)

三、操作步驟的具體要求及評(píng)分點(diǎn)

⑴玻片凝集

①準(zhǔn)備玻片分三格,于第一格和第二格各加一滴傷寒桿菌診斷血清,第三格加一滴生理鹽水

②用滅菌接種環(huán)取傷寒桿菌培養(yǎng)物少許,涂于第三格內(nèi)再涂于第一格內(nèi)分別攪拌均勻成乳液狀

③同法取痢疾桿菌培養(yǎng)物少許涂于涂于第二格內(nèi)混勻

④輕搖玻片,經(jīng)1-2分鐘后觀察結(jié)果

⑵試管凝集

①取小試管7支編號(hào)

②用5ml吸管吸取生理鹽水于每管各加0.5ml

③用1ml吸管吸取溶血素0.5ml加入試管中反復(fù)吹吸三次使之與鹽水混勻,吸出0.5ml注入第2管,以此類(lèi)推稀釋至第6管,自第6管吸出0.5ml棄去。第7管不加血清作對(duì)照。

④各管加綿羊紅細(xì)胞0.5ml混勻,置37℃水浴中3小時(shí)后觀察結(jié)果

⑶間接凝集抑制試驗(yàn)

①用毛細(xì)管滴加一滴被檢材料于玻璃反應(yīng)板的一個(gè)方格內(nèi),再滴加一滴生理鹽水于另一個(gè)方格內(nèi)作為對(duì)照

②各加一滴免疫血清,輕輕搖動(dòng),充分混勻

③再各加一滴致敏乳膠顆粒,緩緩搖動(dòng)3-5分鐘,在較強(qiáng)光線下觀察結(jié)果

ELISA

①包被聚乙烯塑料板,放424小時(shí)

②棄掉包被液,用PBS洗滌3次,甩干后按圖加入患者血清,陽(yáng)性和陰性對(duì)照血清及PBS,放室溫吸附1小時(shí)

③用PBS洗滌3次后甩干,加入酶標(biāo)抗體,放37℃溫箱45分鐘

④用PBS洗滌3次后甩干,加入新配制底物鄰苯二胺液,放37℃溫箱15分鐘

⑤顯色后,加2M硫酸,每孔一滴中止反應(yīng),觀察結(jié)果

 

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